CRISPR / Cas9抗体

抗CRISPR / Cas9抗体を使用する4つの重要な理由

CRISPR / Cas9ゲノム編集なら、遺伝子の効率的な破壊、消化、突然変異、挿入、または置換に、特定のシーケンスでの二本鎖DNA切断を可能にします。トランスフェクションの精度およびCas9発現のレベルは、特定の抗CRISP / Cas9抗体を用いた編集プロセス中に制御される必要があります。

理由1 Cas9タンパク質のトランスフェクションの成功を確認する

検証された抗Cas9抗体を用いたウエスタンブロットでCas9発現レベルをチェックする。

理由2 Cas9タンパク質が核に送達されたことを確認する

有効な抗Cas9抗体を用いてIFまたはIHCを介してCas9タンパク質の核局在を決定する。

理由3 Cas9発現レベルを確認する

一時的なシステム：ウエスタンブロットおよび抗Cas9抗体を使用することによりCas9発現が一過性であることを確認します。 延長されたCas9発現は、より多くのオフターゲット突然変異に繋がります。

安定した形質転換体：いくつかのクローンを単離し、ウエスタンブロットおよび特異的抗Cas9抗体を用いてCas9発現のレベルをチェックするスクリーニング。

高レベルのCas9発現は、非特異的活性をもたらし得ます。

理由4 Cas9の結合特異性を調べる

Cas9が正しい領域に結合しているかどうかを調べるために、ChIPグレードの抗Cas9抗体と標的および非標的領域のプライマーを用いて、選択されたsgRNAとの結合特異性を調べます。

参照論文一覧

• A geminivirus-based guide RNA delivery system for CRISPR/Cas9 mediated plant genome editing
• A localized nucleolar DNA damage response facilitates recruitment of the homology-directed repair machinery independent of cell cycle stage
• Rapid and highly efficient mammalian cell engineering via Cas9 protein transfection
• Use of the CRISPR/Cas9 system as an intracellular defense against HIV-1 infection in human cells
• Genome-wide CRISPR screen in a mouse model of tumor growth and metastasis
• An inducible lentiviral guide RNA platform enables the identification of tumor-essential genes and tumor-promoting mutations in vivo

Diagenodeは、さまざまなアプリケーション（WB、IF、IPおよびChIP）で検証された抗CRISPR / Cas抗体最多コレクションが勢揃いです。